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10 Antibiograma
Microbiologia I (MIC-411)
Universidad Privada Franz Tamayo
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Introducción
Objetivo
Fundamento
Procedimiento
Resultados
Observaciones
INTRODUCCIÓN
La resistencia de las bacterias es el principal obstácu- lo para la eficacia terapéutica de los antibióticos, pues no sólo puede anular la acción curativa si se mani- fiesta en el curso del tratamiento, sino que tiene a la larga consecuencias todavía más graves para el con- junto de la población, ya que provoca la desaparición de las cepas susceptibles y la propagación de las re- sistentes. Ese es el motivo por el cual la determina- ción de la sensibilidad de las bacterias a los antibióti- cos haya adquirido tanta importancia y sea indispen- sable para hacer de los antibióticos un uso racional y para preservar la eficacia de este grupo tan valioso de agentes terapéuticos.
El conocimiento de la sensibilidad a los antibióticos, del microorganismo causante de una enfermedad, no es sólo importante para hacer la selección inicial del agente terapéutico correspondiente, sino que además en aquellos casos en los cuales el paciente presente intolerancia a determinado fármaco, permite selec- cionar el más adecuado para ese paciente en particu- lar.
Trabajo Práctico Nº 3
DETERMINACIÓN DE LA SENSIBILIDAD DE LAS BACTERIAS A LOS ANTIBIOTICOS (ANTIBIOGRAMA)
Los antibiogramas son métodos in vitro que determinan la susceptibilidad de los microorganismos a una variedad de agentes antimicrobianos, bajo condiciones de laboratorio específicas y estandarizadas. La meta principal del estudio de susceptibilidad es proveer al clínico algunas recomendaciones sobre la terapia que puede ser más apropiada en pacientes con una infección específica. No obstante, la correlación exacta entre los resultados in vitro y la respuesta clínica es muchas veces difícil de predecir, ya que existen numerosos factores que in- fluencian la interacción de los agentes antimicrobianos y los microorganismos en un determinado paciente. Entre los factores podemos resaltar:
- Factores del agente antimicrobiano
o Farmacocinética
o Unión a proteínas del plasma
o Vías de administración
o Acción bacteriostática o bactericida
o Concentración en el sitio de la infección
- Factores del huésped
o Enfermedad
o Estado inmunológico
o Formación de absceso
o Presencia de cuerpo extraño
o Función renal y hepática
o Cumplimiento del tratamiento
- Factores del microorganismo
o Virulencia
o Alta concentración de microorganismos
o Infección mixta o Desarrollo de resistencia durante el tratamiento
La metodología usada para realizar el antibiograma toma en consideración algu- nos de estos factores para determinar más eficientemente cómo un microorga- nismo podría responder in vivo a un determinado antibiótico.
Existen diversos métodos para determinar la sensibilidad bacteriana a los antibi- óticos, presentando además cada uno de estos métodos, múltiples variantes.
cm. de diámetro se requieren 30 mL de medio y para una de 15 cm se re- quieren 70 mL.
Deje solidificar el medio de cultivo y luego seque las placas durante 30 mi- nutos antes de usarlas para la inoculación.
Inocule la placa mediante un hisopo estéril utilizando una suspensión del germen de 18 a 24 horas de incubación con una turbidez equivalente a 1,5 x 10 6 bacterias (Equivale al tubo No. 5 de la escala de Mc Farland). Pa- ra la inoculación sumerja un hisopo estéril en el cultivo y elimine el exceso rotándolo firmemente contra la pared interna del tubo. Frote el hisopo sobre la superficie del medio de cultivo.
Repita esta operación por tres veces sucesivas, rotando la placa para obte- ner una dispersión uniforme del inóculo en toda la superficie.
Coloque la tapa a la placa y deje secar el inóculo por 3 a 5 minutos.
Coloque los discos con los antibióticos sobre el agar mediante pinzas esté- riles o usando un aplicador de discos. Oprima los discos suavemente con una pinza para asegurar un buen contacto con el medio de cultivo. Los dis- cos deben estar espaciados de manera que su distancia a la pared de la placa sea de 15 mm y entre ellos de 30 mm.
Incube a 35 – 37°C hasta el siguiente día (aproximadamente 18-19 horas). Si se requieren los resultados con rapidez se pueden leer las zonas de in- hibición después de 6-8 horas de incubación, pero estos resultados deben ser confirmados mediante una nueva lectura después de la incubación por las 18 -19 horas.
La medida del diámetro de la zona de inhibición se hace preferentemente desde el exterior de la placa, sin quitar la tapa, esto puede hacerse con una regla milimetrada, un vernier o cualquier otro Instrumento similar.
Los resultados se interpretan de acuerdo con la tabla 1.
- Ensayos de control con microorganismos cuya sensibilidad se conoce, tales como el Staphyloccccus aureus ATCC 25923 y Escherichia coli ATCC 25922, deben ser efectuados simultáneamente con el de los gérmenes en estudio y las zonas de inhibición obtenidas con ellos deben estar compren- didas entre los valores indicados en la tabla 2.
- Imipenem 10 μg 13 14-15 CARBAPENEMS
- Meropenem 10 μg 13 14-15
- Aztreonam 30 μg 15 16-21 MONOBACTAMAS
- Teicoplanina 30 μg 10 11-13 GLICOPÉPTIDOS
- Vancomicina Enterococos 30 μg 14 15-16
- Vancomicina Estafilococos 30 μg --- ---
- Amicacina 30 μg 14 15-16 AMINOGLUCÓSIDOS
- Gentamicina 10 μg 12 13-14
- Kanamicina 30 μg 13 14-17
- Netilmicina 30 μg 12 13-14
- Azitromicina 15 μg 13 14-17 MACRÓLIDOS
- Claritromicina 15 μg 13 14-17
- Eritromicina 15 μg 13 14-22
- Minociclina 30 μg 14 15-18 TETRACICLINAS
- Tetraciclina 30 μg 14 15-18
- Ciprofloxacina 5 μg 15 16-20 QUINOLONAS
- Fleroxacina 5 μg 15 16-18
- Nalidíxico Ácido 30 μg 13 14-18
- Norfloxacina 10 μg 12 13-16
- Ofloxacina 5 μg 12 13-15
- Trovafloxacina 10 μg 13 14-16
- Cloranfenicol 30 μg 12 13-17 OTROS ANTIMICROBIANOS
- Clindamicina 2 μg 14 15-20
- Nitrofurantoína 300 μg 14 15-16
- Polimixina B 300 U 8 9 -
- Rifampicina 5 μg 16 17-19
- Sulfonamidas 300 μg 12 13-16
- Trimetoprima - Sulfametoxazol 1.25/23 μg 10 11-15
Tabla 2 CONTROLES DEL MÉTODO DE KIRBY BAUER
DIÁMETRO DE LA ZONA DE INHIBICIÓN (en mm) ANTIBIÓTICO CONCENTRACIÓN DEL DISCO
CON S. aureus ATCC 25923
CON E. coli ATCC 25922 Ampicilina 10 μg 24-35 15- Bacitracina 10 U 17-22 --- Cefalotina 30 μg 25-37 18- Cloramfenicol 30 μg 19-26 21- Colistina 10 μg - 11- Eritromicina 15 μg 22-30 8- Gentamicina 10 μg 19-27 19- Kanamicina 30 μg 19-26 17- Meticilina 5 μg 17-22 - Neomicina 30 μg 18-26 17- Novobiocina 30 μg 22-31 - Oleandomicina 15 μg 19-28 - Penicilina G 10 U 26-37 - Polimixina B 300 U 7-13 12- Estreptomicina 10 μg 14-22 12- Tetraciclina 30 μg 19-28 18- Vancomicina 30 μg 15-19 -
RESULTADOS
Antibiograma
Germen ___________________________________
Antibiótico Concentración Diámetro de la zona de inhibición
Interpretación
10 Antibiograma
Asignatura: Microbiologia I (MIC-411)
Universidad: Universidad Privada Franz Tamayo
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